Comparación de métodos de extracción de ADN para el género Astylus (Coleoptera: Melyridae)

Resumo

Una extracción exitosa de ADN es fundamental para el progreso de estudios biológicos que incluyen identificación molecular, inferencia filogenética y genómica así como análisis de secuencias. Si bien los métodos de extracción de ácidos nucleicos son universales, ellos deben ser ajustados de acuerdo a las características de cada taxón estudiado. El objetivo del presente trabajo es comparar métodos de extracción de ADN y orientar en la elección del protocolo más conveniente según las capacidades de cada laboratorio. Se evaluaron cuatro métodos de extracción de ADN de ejemplares del género Astylus atromaculatus (Coleoptera: Melyridae), tomando como indicadores la concentración y pureza del ADN extraído, la can- tidad de material de partida necesario y los costos económicos y de tiempo. Los métodos comparados fueron: 1) KIT comercial “HIGH Pure PCR Template Preparation Kit” © Roche; 2) Precipitación salina con SDS; 3) Precipitación salina con CTAB y 4) Columnas de giro. Los cuatro métodos dieron resultados positivos en cuanto a cantidad y calidad de ADN; respecto al material de partida óptimo las muestras de medio abdomen y un segmento de pata fueron las de mayor rendimiento. El protocolo de CTAB brindó mejores resultados de concentración y pureza. Los protocolos de SDS y COLUMNAS DE GIRO produjeron valores intermedios de concentración y pureza, destacándose el último por su bajo costo económico. El KIT comercial fue el de menor rendimiento y mayor costo económico, pero a la vez fue el más rápido de ejecutar.