Different staining techniques evaluation for the study of sperm morphology and morphometry in bats (Mammalia: Chiroptera)

Ana Sofía Dip; Eduardo Martín; Marcela Beatriz Hernández; Daniela  Miotti

doi:10.30550/j.azl/1891

Autores/as

Ana Sofía Dip CONICET NOA Sur (Centro Científico Tecnológico – Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas), Tucumán, Argentina https://orcid.org/0009-0008-0276-0704
Eduardo Martín Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo, Universidad Nacional de Tucumán https://orcid.org/0000-0001-9000-191X
Marcela Beatriz Hernández Instituto de Fisiología Animal, Fundación Miguel Lillo https://orcid.org/0009-0007-1279-1937
Daniela Miotti Facultad de Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo, Universidad Nacional de Tucumán https://orcid.org/0000-0002-0862-9861

DOI:

https://doi.org/10.30550/j.azl/1891

Palabras clave:

Espermatozoides, Tinción y Marcado, Técnicas de Preparación Histocitológica, Microscopía

Resumen

El estudio de la morfología espermática implica el empleo de diversas técnicas de tinción que permiten la visualización de las diferentes estructuras del espermatozoide y su variabilidad. Cada técnica varía en función de los colorantes empleados y los pasos necesarios para su ejecución. El objetivo de este trabajo fue evaluar distintas técnicas de tinción para el análisis de la morfología y la morfometría espermática en murciélagos. Se recolectaron muestras de epidídimo de 57 ejemplares adultos, que fueron maceradas en solución de Farmer y utilizadas para preparar frotis. Los extendidos fueron coloreados con Azul de Toluidina, Giemsa, May Grünwald-Giemsa, GRAM, Hematoxilina-Eosina, DAPI (4’,6-diamino-2-fenilindol), Fucsina Básica y Verde Jano. Los criterios para la comparación de las técnicas fueron: complejidad, tiempo requerido y costos asociados. Para el análisis morfométrico se tomaron microfotografías al microscopio óptico y de epifluorescencia y se midieron 50 espermatozoides por individuo. Solo se obtuvieron espermatozoides de 16 especímenes: Artibeus planirostris (n=5), Sturnira erythromos (n=3), Molossus molossus (n=4), Molossops temminckii (n=2), Histiotus laephotis (n=1) y Myotis albescens (n=1). Entre las técnicas evaluadas, el Azul de Toluidina demostró ser una técnica rápida, sencilla y de bajo costo para determinar la presencia de espermatozoides y describir su morfología general. Lastinciones dicrómicas como Hematoxilina-Eosina y May Grünwald-Giemsa fueron más eficientes en la diferenciación del núcleo y el acrosoma, aunque también resultaron más complejas y costosas en su realización. En conclusión, recomendamos el uso de las tres técnicas mencionadas anteriormente como las opciones óptimas para los estudios iniciales de morfología espermática en murciélagos.

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Citas

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